离子交换亲和层析柱分别何时使用
简述固定金属离子亲和层析的原理和特点.?
简述固定金属离子亲和层析的原理和特点.?
生物体中许多大分子化合物具有与其结构相对应的专一分子可逆结合的特 性,如抗原与抗体,酶与底物或抑制剂,激素与受体等,这种结合往往是 专一的而且是可逆的,生物分子间的这种结合力称为亲和力,亲和层析的 分离原理简单地说就是通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶 性的基质(也称载体)上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一 个分子进行分离纯化。
被固定在基质上的分子称为配体,配体与基质共价 结合,构成亲和层析的固定相,称为亲和吸附剂,蛋白质的生物特异性 可以帮助选择特异性的配体,一般是目的蛋白质与配体结合而不吸附杂质。
蛋白质吸附后再利用洗脱液的快速变换和加入竞争剂的方法进行洗脱。
阴离子层析柱为什么用氯化钠处理?
因为氯化钠会完全电离。
离子交换柱的工作原理:采用离子交换方法,可以把水中呈离子态的阳、阴离子去除。
以氯化钠(NaCl)代表水中无机盐类,水质除盐的基本反应可以用下列方程式表达:
1、阳离子交换树脂:R—H Na →R-Na H
2、阴离子交换树脂:R—OH CL-→R-CL OH
阳、阴离子交换树脂总的反应式即可写成:
RH ROH NaCL—RNa RCL H2O
由此可看出,水中的Nacl已分别被树脂上的H 和OH-所取代,而反应生成物只有H2O,故达到了去除水中盐的作用。
氨基酸如何鉴定?高中阶段的?
凡是具有游离氨基的氨基酸的水溶液和水合茚三酮反应时都能生成一种紫色的化合物,反应十分灵敏,是鉴定氨基酸最简便 氨基酸,都毫无例外地用茚三酮为显色剂,反应若在溶液中进行,得到的紫色溶液在 570 nm 有强吸收峰。
层析法又称色谱法,是一种物理的分离方法。利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等),使各组分以不同程度分布在固定相和流动相两相中,并使各组分以不同速度移动,从而得到有效的分离。操作方式:纸层析、薄层层析、柱层析等。
分离机理:分配层析、吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析等。
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,展层溶剂由有机溶剂和水组成。滤纸纤维上的羟基具有亲水性,在滤纸上水就被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相。当有机溶剂(流动相)沿纸流动经过层析点时,层析点上溶质就在水相和有机相之间不断进行分配。
由于溶质中各组分的分配系数不同,移动速率也不同,因而可以彼此分开。